192道基因合成儀用于固相合成法,每次將一個(gè)核苷酸加到所接長(zhǎng)的寡核苷酸鏈上,加入每一個(gè)核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。廣泛應(yīng)用在生物技術(shù)、生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)、基因治療、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
192道基因合成儀儀器特點(diǎn):
合成周期短,可以保證序列正確無(wú)誤。
基因合成的基因可以進(jìn)行密碼子優(yōu)化,使基因在各種生物表達(dá)體系中都能得到良好表達(dá)。
基因合成具有更大的靈活性,可以對(duì)基因的酶切位點(diǎn)和基因序列進(jìn)行修改,方便下游的克隆和實(shí)驗(yàn)。
主要用于基因合成、構(gòu)建克隆及基因組變體文庫(kù)合成,按用途可以分為三類(lèi):
1、工業(yè)型合成儀合成通量較大,主要用于大型生物實(shí)驗(yàn)室以及商業(yè)機(jī)構(gòu)中;
2、實(shí)驗(yàn)室型合成儀合成通量較小,主要用于生物實(shí)驗(yàn)室中;
3、大規(guī)模合成型合成儀可進(jìn)行規(guī)模化量產(chǎn),主要用于生物醫(yī)藥原料藥制備領(lǐng)域。隨著基因治療以及生物醫(yī)藥行業(yè)快速發(fā)展,預(yù)計(jì)未來(lái)工業(yè)性以及大規(guī)模合成型DNA合成儀需求增速將加快。
192道基因合成儀合成后的處理步驟:
1.切割:將合成好的寡核苷酸鏈從支持物上化學(xué)切割下來(lái)。
2.脫保護(hù)基:須在此步前選好后續(xù)的純化方法。一般用新鮮的濃氨水處理較長(zhǎng)時(shí)間以脫掉腈乙基、苯甲?;?、異丙基。
3.純化:根據(jù)所合成寡核苷酸的組成和應(yīng)用來(lái)選定純化的方法。
4.定量:根據(jù)寡核苷酸在二百六十納米處的紫外吸收來(lái)定量。
5.儲(chǔ)存:需要注意的是避免紫外線(xiàn)等劇烈的物理環(huán)境,避免反復(fù)凍融,零下二十度可穩(wěn)定保存一年以上。