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引物與探針的區(qū)別與聯(lián)系介紹

更新時間:2022-12-14      點擊次數:2746
  一、探針是電測試的接觸媒介,為高精密型電子五金元器件。
 
  二、原理作用:
 
  1.探針是一小段單鏈DNA或者RNA片段(大約是20到500bp),用于檢測與其互補的核酸序列。雙鏈DNA加熱變性成為單鏈,隨后用放射性同位素(通常用磷-32)、熒光染料或者酶(如辣根過氧化物酶)標記成為探針。磷-32通常被摻入組成DNA的四種核苷酸之一的磷酸基團中,而熒光染料和酶與核酸序列以共價鍵相連。
 
  2.當將探針與樣品雜交時,探針和與其互補的核酸(DNA或RNA)序列通過氫鍵緊密相連,隨后,未被雜交的多余探針被洗去。最后,根據探針的標記物種類,可進行放射自顯影、熒光發(fā)光、酶聯(lián)化學發(fā)光等方法來判斷樣品中是否,或者何位置含有被測序列(即與探針互補的序列)。
 
  三、區(qū)別與聯(lián)系:
 
  1.引物設計的用途:用于PCR擴增技術。引物設計的實質是—小段單鏈DNA或RNA,在核酸合成反應時,作為每個多核苷酸鏈進行延伸的出發(fā)點而起作用的多核苷酸鏈。
 
  2.探針設計的用途:用于標記待定的核苷酸片斷,用與特異性地、定量地檢測核酸的量。探針設計的實質是在紫外-可見-近紅外區(qū)有特征熒光,并且其熒光性質(激發(fā)和發(fā)射波長、強度、壽命、偏振等)可隨所處環(huán)境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
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