48合成儀設(shè)計用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法, 每次將一個核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng) 與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。
48合成儀使用步驟:
1、仔細(xì)檢查合成儀上所有試劑瓶中的試劑量,必要時換掉試劑瓶,特別注意Z腈的量,因為該溶劑用量較大。
2、將標(biāo)記好的清潔的收集瓶裝在合成儀上。
3、將要合成的DNA序列輸入合成儀。
4、檢查選擇的合成步驟是否正確。
5、選擇結(jié)束方法: TritylOffAuto是儀器的原始狀態(tài), 若打算以5,DMT基團連接純化寡核苷酸,將其轉(zhuǎn)變?yōu)門ritylOnAuto結(jié)束狀態(tài)。
6、選擇結(jié)束方法,一般為系統(tǒng)的原始狀態(tài)。
7、在每個柱監(jiān)視器的Username下,輸入你所希望的保存名字。
8、以代碼代替相應(yīng)的DNA序列標(biāo)記每一個收集 瓶。
9、打印出每一個柱設(shè)置的詳細(xì)資料。
10、檢查打印出來的資料是否正確。
11、運行StartColumn步驟檢查每一個柱的位置, 確保合成儀上合成柱處于正確的位置。
12、檢查連接在合成儀上的溶劑殘留(廢液瓶、是否充滿。
13、如果分部收集器用來收集每個DMT脫保護步驟的流出物,確保試管充分清潔干凈,并打開分部收集器,確保DMT廢液管路通向分部收集器。
14、啟動循環(huán),運行開始程序清洗試劑管路,除去原來的試劑。
