了解DNA合成儀的一般操作步驟
更新時間:2023-10-19 點(diǎn)擊次數(shù):1113
DNA合成儀用于固相合成法,每次將一個核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。被廣泛應(yīng)用在生物技術(shù)、生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)、基因治療、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。隨著基因治療以及生物醫(yī)藥行業(yè)快速發(fā)展,預(yù)計(jì)未來一段時間我國DNA合成儀市場需求將繼續(xù)保持快速增長態(tài)勢。
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟:1)仔細(xì)檢查合成儀上所有試劑瓶中的試劑量,必要時換掉試劑瓶,特別注意乙腈的量,因?yàn)樵撊軇┯昧枯^大。2)將標(biāo)記好的清潔的收集瓶裝在合成儀上。5)選擇結(jié)束方法:TritylOffAuto是儀器的原始狀態(tài),若打算以5,—DMT基團(tuán)連接純化寡核苷酸,將其轉(zhuǎn)變?yōu)門ritylOnAuto結(jié)束狀態(tài)。6)選擇結(jié)束方法,一般為系統(tǒng)的原始狀態(tài)。7)在每個柱監(jiān)視器的Username下,輸入你所希望的保存名字。8)以代碼代替相應(yīng)的DNA序列標(biāo)記每一個收集瓶。9)打印出每一個柱設(shè)置的詳細(xì)資料。11)運(yùn)行StartColumn步驟檢查每一個柱的位置,確保合成儀上合成柱處于正確的位置。12)檢查連接在合成儀上的溶劑殘留(廢液瓶)是否充滿。13)如果分部收集器用來收集每個DMT脫保護(hù)步驟的流出物,確保試管充分清潔干凈,并打開分部收集器,確保DMT廢液管路通向分部收集器。14)啟動循環(huán),運(yùn)行開始程序清洗試劑管路,除去原來的試劑。