DNA合成儀的結(jié)構(gòu)和性能
更新時(shí)間:2023-02-27 點(diǎn)擊次數(shù):1506
一、用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動(dòng)化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法,每次將一個(gè)核苷酸加到所接長(zhǎng)的寡核苷酸鏈上,加入每一個(gè)核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學(xué)反應(yīng)和操作細(xì)節(jié)隨不同的儀器而改變,廣泛應(yīng)用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
二、原理組成:
(1)DNA合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮?dú)饧半姶砰y組驅(qū)動(dòng)液體試劑,也可采用氦氣驅(qū)動(dòng)試劑。某些合成儀采用sliderblock滑塊系統(tǒng)及精密蠕動(dòng)泵,可不采用氣體為驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)。采用氣體及電磁閥驅(qū)動(dòng)液體試劑時(shí),需首先將管路系統(tǒng)電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規(guī)定氣壓,通過(guò)合成管理軟件或手動(dòng)打開電磁閥(一般打開時(shí)間為數(shù)ms),即可驅(qū)動(dòng)液體試劑到所需的合成柱中。
(2)試劑輸送系統(tǒng)包括兩個(gè)試劑閥塊(8堿基儀器有3個(gè))及2個(gè)或4個(gè)柱閥塊。閥塊控制氣體和化學(xué)試劑流入柱子及出口。除亞磷酰胺和四唑以外,試劑和溶劑都被同時(shí)輸送到所有活化柱。當(dāng)有多個(gè)活化柱時(shí),對(duì)流速的細(xì)微變化,以自動(dòng)調(diào)節(jié)每個(gè)柱子的輸送次數(shù)來(lái)補(bǔ)償。每一個(gè)5—端口柱閥塊將流出物導(dǎo)入廢液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或沖洗柱內(nèi)和柱閥塊內(nèi)的試劑的氬氣。
(3)試劑通過(guò)底部的luer接頭,流到柱子,如果沒(méi)擰上下面的一個(gè)luer接頭,應(yīng)會(huì)在一個(gè)圓柱形的玻璃流路節(jié)流閥上發(fā)現(xiàn)。試劑通過(guò)流路節(jié)流閥中一個(gè)很小的通道流到柱子。小量的試劑可以在流路節(jié)流閥中結(jié)晶,長(zhǎng)期這樣會(huì)造成流路阻塞。