氨解儀單管氨解與96孔板氨解方法

　　一、單管氨解

　　1、將合成好的柱子用注射器針頭將CPG或樹(shù)脂粉末全部倒入氨解瓶中，并將對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽貼在氨解瓶上。

　　2、加入冰三乙胺100ul，冰氨水1.5ml，蓋緊瓶蓋，放入80度烘箱氨解2小時(shí)。對(duì)用快速氨解單體合成的序列直接加氨水后55度2小時(shí)即可。在生產(chǎn)操作表上準(zhǔn)確記錄開(kāi)始氨解的時(shí)間。

　　注意事項(xiàng):

　?。?）在將引物放入氨解瓶時(shí),要核對(duì)清楚標(biāo)簽,要一一對(duì)應(yīng)。

　?。?）三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象)

　?。?）氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態(tài)中的氨水。
 

　　二、96孔板氨解

　　1、55度氨解

　　對(duì)好標(biāo)簽，向合成板內(nèi)加入適量的乙氰放在墊板上，重量平衡，高速離心。（對(duì)于3900，離心完后需用注射器針頭將砂芯勾出）離心完后，將墊板換成正面貼有對(duì)應(yīng)輪次標(biāo)簽的氨解板上。放入通風(fēng)櫥。先向合成板每孔加入50ul三乙胺，再向每孔加入250ul氨水，用膠帶封好放入氨解盒中，在操作單上登記好時(shí)間和氨解人，放入55度烘箱氨解40min。

　　2、80度氨解

　　40min后取出，放入通風(fēng)櫥趕氨1分鐘，高速離心。拿去合成板用20ul小槍取小樣20ul；在向氨解板每孔內(nèi)加入冰氨水200ul，封好膠帶，用夾板夾好，登記好時(shí)間，放入80度烘箱氨解2h。

　　注意事項(xiàng):

　　（1）務(wù)必在氨解板正面貼上該輪次標(biāo)簽,然后再位置一一對(duì)應(yīng)墊再合成板下面,一起氨解,離心。

　?。?）三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象)

　　（3）氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態(tài)中的氨水。

　?。?）夾板密封時(shí)要注意擰緊,防止出現(xiàn)漏氨。